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핵산 검출 형광 정량 Ct 값 – 애증 매개변수

핵산 검출 형광 정량 Ct 값 – 애증 매개변수

"신형 관상동맥 바이러스 폐렴 진단 및 치료 프로그램(시험 제9판)"은 격리 관리 또는 퇴원 해제를 위한 중요한 근거 중 하나로 핵산 검출 Ct 값 ≥35를 사용합니다.그렇다면 핵산 검출 키트의 Ct 값은 무엇을 나타내는 것일까요?다른 키트의 Ct 값을 비교할 수 있습니까?Ct 값이 낮을수록 키트의 성능이 더 좋아집니까?
Ct 값(Threshold Cycle, Ct)은 실시간 형광 정량적 형광 신호의 세기가 설정된 임계값을 초과할 때의 PCR 주기 수입니다.핵산 검출 키트는 새로운 크라운을 예로 들 수 있습니다.두 개의 바이러스 함유 샘플 A와 B를 검출하기 위한 동일한 키트의 동일한 반응에 대해 Ct 값의 크기는 어느 정도 바이러스 유전자의 사본 수, 즉 바이러스 부하를 나타냅니다.샘플 B의 Ct가 낮을수록 바이러스 부하가 높아집니다.Ct 값은 바이러스 부하와 감염력에 반비례합니다.서로 다른 실시간 형광 정량 키트의 장단점은 서로 다른 키트의 Ct 값을 비교할 수 없기 때문에 Ct 값의 크기만으로 판단할 수 없습니다.키트의 성능 평가는 민감도(최소 검출 한계), 특이성, 정밀도, 안정성 및 진단 적용 측면에서 측정되어야 합니다.시약 제조사마다 18가지 종류의 무술이 있고 적용되는 마법의 힘이 있으므로 여기서는 자세히 설명하지 않겠습니다.
기존의 실시간 정량적 PCR(QPCR) 분석 기기/시스템의 경우 Ct 값의 획득과 병원체 검출 응용 분야에서의 광범위한 사용은 모든 사람에게 친숙합니다.산업의 발전과 기술의 발전으로 QPCR 장비와 시약은 기회와 도전에 직면했습니다.Yiou Think Tank(2021 중국 유전자 검사 산업 연구 보고서: 기술)는 우리나라 QPCR 산업의 대부분의 기업이 기술 기반의 공통적인 문제에 직면해 있다고 분석했습니다.이러한 문제에 대한 솔루션은 크게 기술 개선 가속화와 신기술 배포의 두 가지 유형으로 나뉩니다.
QPCR 분자진단을 위한 POCT는 산업 발전 방향 중 하나이며, 성능 향상은 기술 적용을 가속화하는 중요한 요소입니다.QPCR의 단일 샘플 처리량이 있는 POCT 장비의 경우 R&D에서 단일 반응의 주요 매개변수의 Ct 값을 최적화하는 방법은 무엇입니까?동일한 장비, 동일한 반응 시스템 및 동일한 주형 농도, 이론적으로 단일 반응의 Ct 값이 클수록 반응에서 효소의 효율이 낮아집니다.
효소 반응의 효율을 높이고 Ct 값을 최적화하는 과정에서 일반적인 40 PCR 주기 형광 정량 증폭 곡선을 먼저 분석할 수 있습니다.아래 그림의 증폭 곡선은 형광 배경 단계, 지수 증폭 단계, 선형 단계 및 안정기 단계로 구분됩니다.낮은 형광 배경을 얻기 위해서는 초기 지수 증폭의 형광 값과 최대한 구별하기 위해 반응 소모품 캐리어, 프라이머 프로브 디자인 스크리닝 및 반응 버퍼 시스템에서 테스트해야 합니다.지수 증폭 기간은 효소 활성의 가장 직접적인 반응이며 POCT 장비, 반응 운반체 및 시약의 완벽한 조정의 증거이기도 합니다.이때 장비 온도 제어, 광학 신호 획득 및 분석, 운반체 생체 적합성 및 시약의 시스템 성능을 모든 측면에서 조정하고 테스트해야 합니다.마지막으로 전체 증폭이 완료되고 결과는 합리적인 Ct 값을 얻기 위해 엄격한 데이터 알고리즘에 의해 제시되어야 합니다.
CT 라인
Ct 값 최적화의 작은 단계는 R&D 인력의 수많은 단계입니다.낮과 밤의 불안과 설렘 속에서 “어디에도 산과 강이 보이지 않고, 버드나무는 어둡고, 꽃은 밝으며, 또 다른 마을이 있다”는 때마다 우리에게 앞으로 나아갈 용기와 열정을 줍니다. 다시.


게시 시간: 2022년 9월 29일